超微量分光光度計主要是用在核酸的定量跟蛋白質的直接定量等方面。
與傳統(tǒng)分光光度計相比,超微量分光光度計具備以下優(yōu)勢特點:
(1)所需樣品體積小,僅需0.5—2μl;
(2)不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品自動形成液柱,檢測完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可,避免了因為比色皿清洗不凈帶來的交叉污染;
(3)一般具有多個光程(電機控制自動選擇),而傳統(tǒng)分光光度計的光程為10 mm,超微量分光光度計樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規(guī)分光光度計的50倍;
(4)氙氣閃光燈為燈源,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見),使用壽命更長;
(5)不需要預熱,可隨時檢測,檢測時間短;
(6)顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料);
(7)占據(jù)實驗室空間體積比傳統(tǒng)分光光度計小很多。
使用方法:
1、打開儀器電源開關,開啟比色皿暗箱蓋,調節(jié)“0”電位器旋紐,使電表指針處于透光率(T)“0”位,預熱約20分鐘。
2、調節(jié)波長(λ)調節(jié)旋紐,選擇需用的單色光波長。
3、調節(jié)靈敏度開關,選擇適當?shù)撵`敏度。再用調“0”旋紐復校電表透光率“0”位。
4、將比色皿暗箱蓋合上,將參比溶液(空白)推入光路,順時針旋轉“100%”電位器調節(jié)旋紐使電表指針處于透光率“100%”處。
5、按上述方式連續(xù)幾次調整透光率“0”及“100”,直至不變,即可進行測定工作。
6、將校準溶液和待測溶液推入光路,讀取校準溶液吸光度(A)值。
7、將待測溶液推入光路,讀取待測溶液吸光度值。
8、根據(jù)校準溶液和待測溶液吸光度值及校準溶液濃度計算待測物濃度。